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概述 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，简称SDS-PAGE）是

要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western

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内毒素广泛存在于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌E.coli）细胞壁中。大肠杆菌在表达重组蛋白过程中，会产生

外毒素和内毒素是细茵产生的两大类毒素物质。外毒素是病原菌在代谢过程中分泌到菌体的 物质。产生外

随着基因工程的发展，重组蛋白表达技术目前已比较成熟，原核蛋白表达系统（大肠杆菌表达系统）凭借

大肠杆菌表达系统与蛋白表达纯化 大肠杆菌表达系统遗传背景清楚，目的基因表达水平高，培养周期短，

分离纯化处于重组蛋白表达的下游处理（downstream processing）阶段，且与上游过程紧密相联，如是否带 有亲和标签，是否进行分泌表达等。所以在对目的蛋白表达纯化时，要统一考虑和整体设计，并充分考虑上游对下游的影响。同时，不同的表达系统和培养方法也影响下游的处理过程：目的蛋白表达是否形成包涵体，目的蛋白表达定位（胞内、细胞膜内、周质空间和细胞外） 由上表可知选择将所表达的蛋白分泌到细胞外或周质空间可避免破碎细胞的步

1.蛋白纯化的一般原则 蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段wo本体积大、成分杂，要求所用的树脂高容量、高流速，颗粒大、粒

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野人是一种存在于世界各地，未被证实存在的高等灵长目动物，直立行走，比猿类高等，具有一定的智能。其较为正式的学术名称是“直立高等灵长目奇异动物”。古人类学认为野人可能是远古智人进化到现代人之间缺失的一环，故有生物学家将其分类为人科人属但并非智人种，与现代人类有最近的亲缘关系。“野人”是众多传说的神秘动物中最可能真实存在的一种。对于“野人”，世界上不同地方有不同的称呼，如“雪人”“雪怪”“大脚怪”等。

2015年的一个晚上，克雷格•文特尔对着自己在 iPad 应用中蹦跶着的电子小人乐开了。第二天就是他的69岁生日。文特尔公司的信息总监斯科特•斯凯林杰（Scott Skellenger）给我展示了这个 iPad 应用，白胡子的文特尔是应用里的明星。虚拟的文特尔小人穿着牛仔裤和灰色的V领 T恤衫，不但可以走路，还能跳舞。 在文特尔位于圣迭戈的巨型办公室里，他的妻子兼公关希瑟（Heather）正坐在离我不远的地方。文特尔开玩笑说，他本希望这个应用的用户可以用“

关键词：原核蛋白表达，原核表达，重组蛋白表达纯化摘要：本文介绍了在蛋白表达纯化试验中，对不同来源的材料的预处理。主要从植物，动物和微生物三种源材料的特点和注意事项进行描述，并附有原核蛋白表达的案例。蛋白质在分子生物学中的分类，大体上可分为天然蛋白和重组蛋白。提取天然蛋白和构建重组蛋白都需要先确定生物原材料，如植物材料主要以植物的叶，胚，果实和根茎等为主；动物通常是选用实验动物的器官和组织；而微生物

借助一种新发现的罕见人类抗体，美国斯克里普斯研究所的科学家将白血病细胞转化成抗白血病的免疫细

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