和镍有亲合作用。可以和镍络合。
用于纯化含有6~10个组氨酸标签的蛋白质

同咪唑 -

简单介绍一下原理

组氨酸标签:
在重组蛋白末端融合多个组氨酸成串的肽段(常用6个组氨酸)。凭借此组氨酸肽段与二价金属离子(镍、锌等)的螯合作用，便于用金属螯合亲和层析纯化蛋白质。也可以用针对组氨酸肽段的抗体来检测该融合蛋白。6个组氨酸的肽段可简写为6×His。
简单来说就是在表达蛋白的那段基因的序列中插入表达六个组氨酸的序列，然后表达出的蛋白就在特定位置（一般是两头）带上了六个组氨酸。


由于是在原核生物中表达，所以混有大量的其他的杂质蛋白。
需要提纯。

六个组氨酸和镍的亲和力很强。镍固定在一定的支持物上，做成液体可以流过的柱子。然后把这个蛋白混合物通过柱子，带有六个组氨酸标签的目的蛋白就会被挂在柱子上。
然后使用含有咪唑的洗脱液洗脱。组氨酸中有咪唑基，只要溶液中有大量游离咪唑，组氨酸就会被这些游离的咪唑替代下来，咪唑与镍去络合，而蛋白回到溶液中，从而实现了该蛋白的提纯。

生化怪男！