多胺氧化酶是一种这样类型的酶,它可以将多胺类物质比如精胺、腐胺、亚精胺氧化成胺类,以及对应的酮类产物。因此,多胺氧化酶参与并调节植物体内的多胺物质的代谢,从而对植物的生长和发育起着重要的促进作用。
如果多胺氧化酶的活性降低,多胺物质含量相对增加。多胺物质能够阻止细胞的衰老,而多胺氧化酶能把多胺给氧化掉,就会促进细胞衰老。多胺氧化产物有过氧化氢,它可以诱导细胞内钙离子浓度升高,从而影响到细胞代谢和信号的传到。检测多胺氧化酶,这里用到的方法有分光光度法、酶联免疫法等。
分光光度法检测的原理:多胺氧化酶能够和某些试剂发生反应,反应的过程中会形成可使用光谱检测到的化合物。常用的试剂有二氢吡啶、硫代硫酸钠等。其中,二氢吡啶法是常用的一种。当二氢吡啶和多胺氧化酶发生反应的时候,生成了吡啶酮和过氧化氢。此时,过氧化氢在过氧化酶的作用下和底物发生显色反应,在550nm处具有特征的吸收峰。反应产物颜色的变化和多胺氧化酶活性成正比,通过测定吸光度值的方式来,根据标准曲线计算出样品中含有多胺氧化酶的活性。
酶联免疫吸附(ELISA)法:通常情况下,采用elisa的方法检测多胺氧化酶,可以采用试剂盒的形式测定。向预先包被抗体的微孔中,以此加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB进行显色反应,在反应的过程中TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸的作用下最终转化为黄色。颜色的深浅和样品中多胺氧化酶的含量是成正相关的。通过酶标仪,在450nm波长下测定吸光度值,结合标准曲线计算出样品中的多胺氧化酶活性。
来源:上海优选生物。
如果多胺氧化酶的活性降低,多胺物质含量相对增加。多胺物质能够阻止细胞的衰老,而多胺氧化酶能把多胺给氧化掉,就会促进细胞衰老。多胺氧化产物有过氧化氢,它可以诱导细胞内钙离子浓度升高,从而影响到细胞代谢和信号的传到。检测多胺氧化酶,这里用到的方法有分光光度法、酶联免疫法等。
分光光度法检测的原理:多胺氧化酶能够和某些试剂发生反应,反应的过程中会形成可使用光谱检测到的化合物。常用的试剂有二氢吡啶、硫代硫酸钠等。其中,二氢吡啶法是常用的一种。当二氢吡啶和多胺氧化酶发生反应的时候,生成了吡啶酮和过氧化氢。此时,过氧化氢在过氧化酶的作用下和底物发生显色反应,在550nm处具有特征的吸收峰。反应产物颜色的变化和多胺氧化酶活性成正比,通过测定吸光度值的方式来,根据标准曲线计算出样品中含有多胺氧化酶的活性。
酶联免疫吸附(ELISA)法:通常情况下,采用elisa的方法检测多胺氧化酶,可以采用试剂盒的形式测定。向预先包被抗体的微孔中,以此加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB进行显色反应,在反应的过程中TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸的作用下最终转化为黄色。颜色的深浅和样品中多胺氧化酶的含量是成正相关的。通过酶标仪,在450nm波长下测定吸光度值,结合标准曲线计算出样品中的多胺氧化酶活性。
来源:上海优选生物。