实验吧 关注:4,815贴子:46,689
  • 0回复贴,共1

AARS1乳酸转移酶,用乳酸作为直接乳酸供体

只看楼主收藏回复

AARS1作为一种蛋白质乳酸转移酶,使用乳酸作为直接的乳酸供体
第一步,AARS1与乳酸存在结合 分子对接预测乳酸可以很容易地结合到AARS1的催化口袋上(图1a)。等温滴定量热法验证了该结果(图1b)。
第二步,确定AARS1是一种乳酸转移酶
体外乳酸化实验,显示AARS1能够以依赖于乳酸和ATP的方式直接使组蛋白H3和H4乳酸化(图1c);质谱分析,显示AARS1能直接在K18处乳酸化H3肽(图1d)。AARS1催化袋内氨基酸残基突变体(5M)消除了其乳酸转移酶活性(图1c-d)。表明乳酸结合对AARS1介导的蛋白乳酸化的必要性,并且AARS1直接使用乳酸作为乳酸供体。
第三步,AARS1可以直接与乳酸结合并将其转移到赖氨酸
由于L-丙氨酸与AARS1的亲和力略高于乳酸,因此在反应体系中加入L-丙氨酸可剂量依赖性地抑制AARS1介导的组蛋白H3乳酸化。表明AARS1可以直接与乳酸结合并将其转移到赖氨酸(图1e-f)。
另外,敲低AARS1可降低蛋白质的乳酸化水平(图1g)。表明AARS1以ATP为能量源,乳酸为供体,直接催化蛋
质的乳酸化。

图1 AARS1作为一种蛋白质乳酸转移酶,细胞内乳酸增加促进AARS1核易位(Ref. Fig 1/2/S1)
更多详细精彩内容可查阅我们的软文分享:【 《JCI》解读:肿瘤乳酸化修饰与泛素化修饰对抗!丙烯酰tRNA合成酶AARS1乳酸化修饰YAP复合体促进信号传导 】
互作机制研究系统性解决方案,包括免疫沉淀试验(IP、RIP、CHIP、CHIRP)和蛋白组芯片检测试验,协助轻松突破互作机制,让科研成果更上一层楼。
如有相关机制研究,欢迎随时留言探讨。


IP属地:广东1楼2024-09-06 10:36回复