一、百萤 pH荧光探针Protonex 红600参数
Ex(nm) 576
Em(nm) 597
分子量 698.94
溶 剂 DMSO
存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮
二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述
Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料在细胞外是非荧光的，但在酸性区室（如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的红色荧光。这种Protonex Red可以对细胞酸性隔室进行特异性检测，降低信号可变性，提高成像或流量应用的准确度。它还可以用于多重细胞功能分析与绿色染料，如GFP，Fluo-8，钙黄绿素或FITC标记的抗体。Protonex Red具有与德克萨斯红相似的光谱特性，使得普通的德克萨斯红过滤器可用于Protonex Red的分析。
图1.用 Protonex Red红 600 染色的活 HeLa 细胞的图像。将活 HeLa 细胞接种到 96 孔板中并培养过夜。除去生长培养基后，用 Hanks 平衡盐溶液 (HBSS) 洗涤细胞，然后用 0.6 µM Protonex Red红 600 在 37°C 下染色 30 分钟。染色后，再次用 HBSS 洗涤细胞，并使用带有 TRITC 滤光片的荧光显微镜成像。
图2.Protonex Red 红600 的 pH 依赖性发射光谱。
三、百萤 pH荧光探针Protonex 红600实验方案
操作步骤
在制作Protonex 工作溶液之前，根据需要处理细胞。
1.在DMSO中制备1至10 mM Protonex 储备液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液（HHBS）或所选缓冲液的Hanks溶液中，制备0.1至10μM的工作溶液。
2.根据需要处理细胞，将细胞与Protonex 工作溶液在37ºC下孵育15分钟至2小时。
3.用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。
4.使用配有正确滤光片组的适当荧光仪器分析细胞
Ex(nm) 576
Em(nm) 597
分子量 698.94
溶 剂 DMSO
存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮
二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述
Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料在细胞外是非荧光的，但在酸性区室（如吞噬体，溶酶体和内体）中发出明亮的红色荧光。这种Protonex Red可以对细胞酸性隔室进行特异性检测，降低信号可变性，提高成像或流量应用的准确度。它还可以用于多重细胞功能分析与绿色染料，如GFP，Fluo-8，钙黄绿素或FITC标记的抗体。Protonex Red具有与德克萨斯红相似的光谱特性，使得普通的德克萨斯红过滤器可用于Protonex Red的分析。
图1.用 Protonex Red红 600 染色的活 HeLa 细胞的图像。将活 HeLa 细胞接种到 96 孔板中并培养过夜。除去生长培养基后，用 Hanks 平衡盐溶液 (HBSS) 洗涤细胞，然后用 0.6 µM Protonex Red红 600 在 37°C 下染色 30 分钟。染色后，再次用 HBSS 洗涤细胞，并使用带有 TRITC 滤光片的荧光显微镜成像。
图2.Protonex Red 红600 的 pH 依赖性发射光谱。
三、百萤 pH荧光探针Protonex 红600实验方案
操作步骤
在制作Protonex 工作溶液之前，根据需要处理细胞。
1.在DMSO中制备1至10 mM Protonex 储备液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液（HHBS）或所选缓冲液的Hanks溶液中，制备0.1至10μM的工作溶液。
2.根据需要处理细胞，将细胞与Protonex 工作溶液在37ºC下孵育15分钟至2小时。
3.用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。
4.使用配有正确滤光片组的适当荧光仪器分析细胞
