1. 为何要及时固定样本?
采用物理或化学手段对样本进行固定,目的是尽可能保留其接近活体状态的结构特征,确保细胞内部的各种组分不被自身的酶分解而自溶,同时防止外界微生物的侵入和繁殖对细胞超微结构造成破坏。
电镜固定液中常用的戊二醛,对于糖原、核蛋白、微管、内质网等膜系统以及细胞基质,均展现出了良好的固定效果。
2. 冷冻后的样本是否适用于电镜观察?
冷冻处理后的样本不再适合进行电镜观察,因为冷冻过程中形成的冰晶会破坏样本的超微结构,或者导致组织内部出现空洞。因此,需要重新制备样本,并及时进行固定处理。
3. 半薄切片与超薄切片的厚度标准是多少?
半薄切片是通过将树脂包埋的样本进行切割,其厚度通常控制在1.5微米左右,使用防脱玻片进行捞取,主要用于超薄切片的定位或显微结构的初步观察。
而超薄切片的厚度则更为精细,一般在50至80纳米之间,采用无碳芳华膜铜网进行捞取,并进行重金属染色处理。
4. 电镜图像模糊的原因是什么?
电镜图像模糊主要是由于组织细节丢失所致。这可能是由于组织未得到及时固定而发生了自溶,或者组织块在取材时过大、质地过于致密,导致固定液无法及时渗透。此外,部分组织区域出现病变也可能导致细节丢失和图像模糊。
5. 为何磁性材料不适用于电镜实验?
磁性材料在电镜实验中会导致电子束发生偏转,从而对电镜设备造成潜在的损害。因此,带有磁性的材料无法用于电镜实验。
6. 半薄切片可以进行哪些染色处理?
半薄切片可以进行甲苯胺蓝染色处理。
7. 图片倍数和标尺与参考文献不一致的原因是什么?
由于不同电镜厂家以及同一厂家不同型号的电镜在成像CCD上存在差异,因此图片上的倍数和标尺只能作为参考。具体使用时,应根据图片的显示效果进行灵活调整。
8. 透射电镜图片的分辨率是多少?
透射电镜图片的分辨率通常可以达到322dpi。
9. 透射电镜实验中的负染是什么?
负染,也称为负反差染色,是一种在标本外周形成电子无法穿透的包围层的技术。这样,标本本身相对能够通过更多的电子,在电镜下呈现出较浅淡的颜色,与周围的深暗背景形成鲜明的反差。这种技术主要用于颗粒悬滴样本的制备,如外泌体、病毒、脂质体和纳米材料等。
10. 透射电镜照片中的标注信息有哪些及其含义?
透射电镜照片在拍摄过程中,系统会自动生成一系列相关信息,并显示在照片的左下角。其中,“x-k”代表放大倍数,一个标尺可能对应多个倍数;“Zoom”代表系统预设的变焦方案;“HC”代表高反差模式(而“HR”则代表高分辨模式);“kV”代表加速电压;“Hitachi TEM system”则表明所使用的是日立透射电镜系统。
此外,照片上还可能标注有具体的放大倍数范围,如“x200~x200,000 (HC)”或“x4000~x600,000 (HR)”,以便用户更准确地了解照片的信息。
采用物理或化学手段对样本进行固定,目的是尽可能保留其接近活体状态的结构特征,确保细胞内部的各种组分不被自身的酶分解而自溶,同时防止外界微生物的侵入和繁殖对细胞超微结构造成破坏。
电镜固定液中常用的戊二醛,对于糖原、核蛋白、微管、内质网等膜系统以及细胞基质,均展现出了良好的固定效果。
2. 冷冻后的样本是否适用于电镜观察?
冷冻处理后的样本不再适合进行电镜观察,因为冷冻过程中形成的冰晶会破坏样本的超微结构,或者导致组织内部出现空洞。因此,需要重新制备样本,并及时进行固定处理。
3. 半薄切片与超薄切片的厚度标准是多少?
半薄切片是通过将树脂包埋的样本进行切割,其厚度通常控制在1.5微米左右,使用防脱玻片进行捞取,主要用于超薄切片的定位或显微结构的初步观察。
而超薄切片的厚度则更为精细,一般在50至80纳米之间,采用无碳芳华膜铜网进行捞取,并进行重金属染色处理。
4. 电镜图像模糊的原因是什么?
电镜图像模糊主要是由于组织细节丢失所致。这可能是由于组织未得到及时固定而发生了自溶,或者组织块在取材时过大、质地过于致密,导致固定液无法及时渗透。此外,部分组织区域出现病变也可能导致细节丢失和图像模糊。
5. 为何磁性材料不适用于电镜实验?
磁性材料在电镜实验中会导致电子束发生偏转,从而对电镜设备造成潜在的损害。因此,带有磁性的材料无法用于电镜实验。
6. 半薄切片可以进行哪些染色处理?
半薄切片可以进行甲苯胺蓝染色处理。
7. 图片倍数和标尺与参考文献不一致的原因是什么?
由于不同电镜厂家以及同一厂家不同型号的电镜在成像CCD上存在差异,因此图片上的倍数和标尺只能作为参考。具体使用时,应根据图片的显示效果进行灵活调整。
8. 透射电镜图片的分辨率是多少?
透射电镜图片的分辨率通常可以达到322dpi。
9. 透射电镜实验中的负染是什么?
负染,也称为负反差染色,是一种在标本外周形成电子无法穿透的包围层的技术。这样,标本本身相对能够通过更多的电子,在电镜下呈现出较浅淡的颜色,与周围的深暗背景形成鲜明的反差。这种技术主要用于颗粒悬滴样本的制备,如外泌体、病毒、脂质体和纳米材料等。
10. 透射电镜照片中的标注信息有哪些及其含义?
透射电镜照片在拍摄过程中,系统会自动生成一系列相关信息,并显示在照片的左下角。其中,“x-k”代表放大倍数,一个标尺可能对应多个倍数;“Zoom”代表系统预设的变焦方案;“HC”代表高反差模式(而“HR”则代表高分辨模式);“kV”代表加速电压;“Hitachi TEM system”则表明所使用的是日立透射电镜系统。
此外,照片上还可能标注有具体的放大倍数范围,如“x200~x200,000 (HC)”或“x4000~x600,000 (HR)”,以便用户更准确地了解照片的信息。