在自然界中，真菌以其独特的生物特性和广泛的应用领域，成为了生物多样性中不可或缺的一环。从餐桌上的美味蘑菇到致命的毒菌，从医药领域的青霉素到食品发酵的必备良剂，真菌在人类社会中发挥着多重作用。然而，随着生态环境的改变和人类活动的加剧，许多真菌种类正面临生存危机。因此，真菌的保藏工作显得尤为关键，它不仅是生物多样性保护的重要组成，也是科学研究和产业发展的基石。
真菌保藏，作为一项至关重要的生物技术，旨在特定条件下保存真菌菌种，确保其活性与遗传稳定性。接下来，介绍几种主流的真菌保藏技术。
NO.01
液体石蜡覆盖法
• 此法通过覆盖灭菌的液体石蜡于培养物上，以隔绝空气并减缓代谢。尽管操作简便，但长期保存效果有限，且存在易燃、易污染等风险。
NO.02
真空冷冻干燥法
• 该技术利用冷冻与减压下的升华现象去除水分，使细胞活动停滞。它适用于多数产孢子真菌，但操作复杂，需专业设备支持。
NO.03
液氮超低温保藏法
• 通过将菌种悬液快速冻结并存储在液氮中，实现长期保存。此法操作简便，适用范围广，但需持续供应液氮，成本较高。
NO.04
定期移植培养法
• 通过定期将菌种移植至新鲜培养基上以保持其活性。虽然经济简单，但易导致菌种变异与退化，且操作繁琐。
NO.05
冷冻干燥保藏法
• 结合冷冻与干燥技术，实现菌种的长期保存。此法存活率高，便于运输，但操作复杂，不适用于所有微生物种类。
NO.06
土壤保存法与干燥剂保存法
• 这两种方法分别利用土壤环境和干燥剂来保持菌种的特定生存环境，适用于特定菌种和实验条件。
在选择保藏方法时，需综合考虑菌种的特性、保藏目的、设备条件及操作复杂度。例如，对于需长期保存且稳定性要求高的菌种，液氮超低温保藏法可能是最佳选择；而对于频繁使用且操作简便性要求高的菌种，定期移植法则更为适宜。
接下来，让我们以液体石蜡覆盖法和真空冷冻干燥法为例，进一步了解它们的操作细节与优缺点：
液体石蜡覆盖法：
• 操作步骤：首先，将液体石蜡灭菌处理并蒸发水汽；然后，在适宜培养基上培养真菌菌种至健壮；接着，用灭菌吸管将液体石蜡注入培养基上，覆盖菌种；最后，将试管直立放置于低温或室温下保存。
• 优缺点：此法制作简单，无需特殊设备，且菌种可保存一定时间。但长期保存存活率较低，占用空间大，易污染，且液体石蜡易燃。
真空冷冻干燥法：
• 操作步骤：首先，准备安瓿管并灭菌；然后，制备菌体保护剂（如10%脱脂牛奶溶液）；接着，培养菌种并确保其纯度与健壮度；将菌种悬液分装入安瓿管；进行冻结、干燥与封口处理；最后，保存于冰箱或暗处。
• 优缺点：此法可实现长期保藏，存活率高，便于运输，且不易受污染。但操作复杂，需专业设备支持，且不适用于所有微生物种类。