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0(一)溶液配置中常见错误操作 1. 忽视量具检定:未选用带检定标识的量具; 2. 试剂处理不当:溶解及稀释时发生洒落; 3. 转移失误:溶解及转移试剂时,遗漏使用玻璃棒; 4. 标准溶液配制疏忽:未将储备液移至洁净小烧杯内取用; 5. 安瓿瓶操作危险:提取标准溶液时,缺乏固定防护; 6. 移液管使用错误:拿法不当,涉及移液管与洗耳球; 7. 移液管位置不当:移液管下端提出液面后,未紧贴盛液器皿内壁; 8. 清洁不足:移液管移出后,未用滤纸
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0ELISA(酶联免疫吸附测定)实验常见标本的采集处理及保存方法对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。以下是对血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆液以及尿液、唾液等其他液体生物样本的采集处理及保存方法的详细介绍。 PART 01样本的收集与处理01血清 • 收集:使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集静脉血。 • 处理:将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。随后,在4℃条件下以1000×g离心20分钟,仔细收
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0在qPCR实验的流程中,从样本的收集直至最终结果的解读,涉及多个精细步骤:样本的获取、保存、预处理、检测以及数据的深度分析。在这一系列环节中,对照的应用显得尤为重要,它是确保实验准确性的关键。对照主要分为两大类:阴性对照与阳性对照。 阴性对照的作用 在实验过程中,我们时常面临一个挑战:如何准确区分反应孔中的扩增信号是来自样本的真实扩增,还是由于污染所导致的非特异性扩增?阴性对照的存在正是为了解决这一问题。
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0在自然界中,真菌以其独特的生物特性和广泛的应用领域,成为了生物多样性中不可或缺的一环。从餐桌上的美味蘑菇到致命的毒菌,从医药领域的青霉素到食品发酵的必备良剂,真菌在人类社会中发挥着多重作用。然而,随着生态环境的改变和人类活动的加剧,许多真菌种类正面临生存危机。因此,真菌的保藏工作显得尤为关键,它不仅是生物多样性保护的重要组成,也是科学研究和产业发展的基石。 真菌保藏,作为一项至关重要的生物技术,旨
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0000000000000000001这吧里真的有人吗132我先来,内蒙古农业大学5本人大二,动植物检疫,日子过得一般,学校一般,但是想考研,因为知道不考研是没啥前途的,虽然还1翻了翻群里的帖子,基本都是多年前的了,没有多少新生力量进入了本人也动植物检疫专业大二了,不知道这个吧有没有一天会活起来,在我们专业起热度之后,虽然希望渺茫024动检!动检!我是动检……我木有看错!动植物检疫,终于有吧了!狂high中…………2为毛我才7级!!!虽然我偶尔逛一下,回复一下,偶尔还发个帖呢,怎么就升级那么慢!!!谁能告诉我妙招哇~~~~1转眼就要六月了,很着急,学校还没有定下来 方向定了预防兽医, 学校在南农,浙大,扬大里徘徊 南农4400001、蛋白样品不能反复冻融; 2、蛋白样品应加蛋白酶抑制剂,以增加蛋白的稳定性(建议最好能多加几中种蛋白酶抑制剂); 3、细胞水平要做Western Blot,一般地5×106个细胞提取的蛋白够就足Western Blot; 4、如果目标蛋白是膜蛋白和胞浆蛋白,所用的去垢剂就要温和得多,建议提取后最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性; 5、若转膜不完全,可以加大上样量,还有转移时你可以用降低电流延长时间,转膜液中甲醇的比例多加5-10%; 6、如果上样量超载,001、蛋白样品不能反复冻融; 2、蛋白样品应加蛋白酶抑制剂,以增加蛋白的稳定性(建议最好能多加几中种蛋白酶抑制剂); 3、细胞水平要做Western Blot,一般地5×106个细胞提取的蛋白够就足Western Blot; 4、如果目标蛋白是膜蛋白和胞浆蛋白,所用的去垢剂就要温和得多,建议提取后最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性; 5、若转膜不完全,可以加大上样量,还有转移时你可以用降低电流延长时间,转膜液中甲醇的比例多加5-10%; 6、如果上样量超载,001 什么是血清? 血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后,分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。血清的主要作用是提供基本营养物质,包括激素、维生素、转运蛋白、微量元素、扩散因子和生长因子等细胞增殖和维持的必需成分,促进细胞生长。 02 血清的有什么作用? 血清的成分十分复杂,既有协助物质运输的蛋白、营养物质,还有促进细胞生长的激素和因子等,正因为血清这种天然成分的复杂性,使0什么是生物学重复? 有一些要求严格的期刊,是需要作者将同一个实验重复多次的。例如nature发表的文章的figure legend中,往往会标“this experiment was repeated twice”或“data representative of three independent experiment”。这些指的都是实验的重复次数,也就是要有生物学重复。当然有些杂志并没有对实验重复的次数有硬性要求,也自然不会要求作者上传所有重复实验的原始数据,仅需要上传出现在文章figure中用于作图的数据即可。 “生物学重复”是指在生物学0脾细胞是ELISpot和FluoroSpot测定中使用最多的细胞,至少对小鼠和大鼠样本而言是如此。脾细胞可以很容易地从脾脏中分离出来,而不需要Ficoll分离。细胞可以在分离后直接使用,也可以冷冻保存,并在以后批量使用。 下面是编译自https://www.mabtech.com/knowledge-hub/isolation-freezing-and-tha的关于如何最好地(i)分离、(ii)冻存和(iii)复苏脾细胞的详细指南。 脾细胞的分离 材料 细胞过滤器,70µm尼龙,无菌 无菌剪刀和镊子或镊子 无菌培养皿 巴氏移液管,无001实验目的 基因表达是生物学研究中的重要内容之一,而基因表达载体则是基因表达研究中不可或缺的工具。基因表达载体是一种能够将外源基因导入到细胞中并使其表达的DNA分子。在细胞内,基因表达载体可以通过转录和翻译的过程将外源基因转化为蛋白质,从而实现基因表达。 02实验原理 表达载体是用来在受体细胞中表达外源基因的载体,原核表达载体通常为质粒,表达载体除具有克隆载体所具有的性质以外,还应具有表达元件(转录和翻译所0WB实验作为分子生物学中最为常见的实验,却蕴含了很多技巧与知识,那要怎样才能做出漂亮的WB检测结果呢? 接下来小编将从蛋白样本制备、凝胶配制、电泳、转膜、封闭、抗体杂交等方面详细讲解wb检测过程中常见容易忽略的操作错误与注意事项,新手必看。 WB实验注意事项 01蛋白样本制备 1. 蛋白质的样品制备注意以下问题: (1)在合适的条件下,保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。 (2)选择合适的表面活性剂和还原剂,使其形成各自多肽的0液氮罐的定义 采用真空绝热保温技术制作的容器,放液氮于其中,利用液氮常压下沸点-196℃的原理,实现生物样本长时间低温保存的设备。 液氮罐的分类 根据液氮罐的不同指标,液氮罐有不同的分类。 按用途分 按用途分,可以分为液氮存储罐和液氮运输罐两种。其中液氮存储罐适合于不同容量长时间的稳定存储,罐体不能用来运输,运输存在安全隐患。液氮运输罐具有体积小和减震结构设计,适用于少量样本的转移存储和短距离运输使用。 按液0多重 PCR 普通 PCR 仅对单一基因进行定性或半定量,对多个基因进行检测时需要分为多个独立体系进行扩增,虽操作简单,但工作量大,耗时耗力浪费样本及试剂。 而多重 PCR 同时能够比对多个扩增子,联合应用 RT-PCR 技术还可达到定量的目的。不仅如此,多重 PCR 还被用于靶向建库测序技术中的文库快速构建。 多重 PCR 常被用于:病原体识别、高通量 SNP 基因分型、突变分析、模板定量、连锁分析、RNA 检测、法医研究。 原位杂交 PCR 原位 PCR 常用于研10前言 PCR(polymerase chain reaction)聚合酶链式反应是众所周知的分子生物学技术之一。1983年春天,Kary Mullis博士在加利福尼亚山间公路上驾车时,突然想到了“多聚酶链式反应”的概念,并发明出用于扩增目标DNA的研究工具,就是我们今天所熟知的PCR方法。 最初的PCR扩增产物分析需要打开反应管,这种操作通常会因为气溶胶的产生,而引起实验室严重的扩增产物污染。在1993年Higuchi等使用数字成像系统实现了PCR的定量,并报道了全封闭的单管扩增实时PCR(real0Western blot的洗液TBST是实验室常用的配制液体,对于TBST的配方也基本上相差不多,其中配方中就有一种组分是Tween-20,一种黄色或琥珀色澄明的油状液体,具有特殊的臭气和微弱苦味。用移液枪吸取时会有一种滞后感。为什么在Western blot的洗液TBST中要加入这么一种试剂,Tween-20在Western blot 中在发挥什么样的作用呢? 1、Tween-20 首先了解一下什么是Tween-20。Tween-20也写作Tween 20,也称Polyethylene glycol sorbitan monolaurate,中文名为吐温-20或吐温20。Tween-20为黄色或0分子克隆(基因克隆/DNA重组/载体构建)技术是一种在分子水平上操作的技术,用于将特定的DNA片段从供体生物中分离出来,然后通过体外重组、转化和转导等方法,将其插入到适合的克隆载体中,并将重组克隆载体引入到合适的寄主体内进行复制与扩增。可以应用于蛋白表达、病毒包装、基因治疗、细胞治疗、mRNA疫苗、RNA干扰、细胞功能等研究。 具体操作流程:一、聚合酶链式反应(PCR)DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,