正确的样本保存方法是实验成功的关键，因为不当的保存技术可能会导致样本变质或受损。我们深知，在实验开展前，如何妥善保存细胞、组织、植物和细菌等各类样本，是众多研究者面临的一大难题和学习重点。因此，我们将深入讨论并分享不同样本的处理与保存策略，期望能为您提供有益的参考。 一、细胞样本保存 01悬浮细胞 • 首先，将细胞及其培养液一并收集至15ml或50ml的离心管中，以1500rpm的速度离心3分钟，随后弃去上清液。 • 接着，加入

在进行Western Blot（WB）实验时，SDS-PAGE凝胶的制备是至关重要的一步，它直接影响到后续实验结果的清晰度和准确性。以下是一些关于SDS-PAGE凝胶制备的技巧及常见问题的解决方法： SDS-PAGE凝胶制备步骤 1. 玻璃板梳子的清洁 • 步骤：先用自来水浸泡玻璃板5分钟，然后用洗洁精清洗。注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶，可以用尖锐的东西轻刮。之后用自来水冲洗干净泡沫，再用纯水冲洗。最后，可以选择37度烘干或者使用吹风筒吹干，但注意避免用热风

实时荧光定量逆转录PCR（real-time quantitative reverse transcription PCR，简称RT-qPCR）是一种在PCR实验中，以RNA为起始材料的检测技术。此方法首先利用逆转录酶，将总RNA或信使RNA（mRNA）转录成互补DNA（cDNA）。 接着，以生成的cDNA作为模板，进行实时荧光定量PCR反应。RT-qPCR技术已广泛应用于分子生物学的多个领域，如基因表达水平分析、RNA干扰效果验证、微阵列数据验证、病原体筛查、基因诊断以及疾病相关研究。 RT-qPCR的两种实施方式：一步法与两步法 一步

一、实验前期筹备 在进行细胞传代之前，有几项关键的预备工作需要完成： 1. 预热试剂：首先，将配置完毕的培养液、PBS溶液以及胰蛋白酶瓶置于37°C的水浴锅中进行预热。这一步骤对于确保细胞在最佳温度下生长至关重要。 2. 消毒处理：接下来，使用75%浓度的酒精对经过紫外线消毒的超净工作台以及操作者的双手进行彻底擦拭，以减少实验过程中的微生物污染，确保实验环境的纯净。 3. 器械布置：合理摆放实验所需器械，确保操作空间充足，既便

荧光素酶报告基因（Luc）系统，依托荧光素为底物，巧妙检测萤火虫荧光素酶活性。此酶能催化荧光素氧化为oxyluciferin，过程中释放生物荧光，成为研究热点。 荧光素酶家族庞大，能催化多样底物发光，而哺乳细胞却无此内源酶。其中，细菌荧光素酶因热敏性在哺乳细胞研究中受限；萤火虫荧光素酶则凭借高灵敏度、宽检测范围（7-8个数量级），成为哺乳细胞研究的首选，尤其适合高通量筛选。更值得一提的是，新型萤火虫荧光素酶无需细胞裂解即

#01腹腔注射构建模型 选取6至8周雄性C57BL/6小鼠（体重约18-20g），首先称重并观察其状态，排除呼吸异常、毛发无光泽、行为异常或驼背等不健康个体。CCl4通常以0.5-0.7µL/g体重的比例稀释于玉米油中用于造模，而急性中毒模型则需更高剂量（0.8-2µL/g体重），但需在1-3天内安乐死小鼠。注意，注射液（CCl4或CCl4/玉米油混合液）应保持室温或接近体温。 为便于操作，建议固定注射体积为50µL，根据小鼠体重调整CCl4与玉米油的比例，确保总体积达到50µL。例

随着精神神经相关疾病的发病率逐年上升，构建相关疾病的动物模型已成为精神神经科学研究的重大课题。本文将从不同类别、各类实验的具体操作、实验的利弊等多个维度进行阐述。 实验动物的行为学评估是构建动物模型的前提，它能为研究者提供大量宝贵信息，有助于建立更加贴近真实的精神神经相关疾病动物模型。 一、学习记忆类 学习与记忆能力是人类的核心认知功能之一，其在精神疾病中的异常也颇为常见。在动物行为学评估中，常用的学

流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种可在细胞或分子水平，对单细胞和亚细胞结构进行快速检测、分析或分选的多功能生物技术。由于其具有可对大量细胞进行高通量检测、可对单个细胞进行多参数分析，和能够同时进行细胞分析和细胞分选等优势，FCM在生物医学基础研究和临床研究中得到了广泛应用。 FCM在20世纪50年代被首次提出，并在此后得到快速发展和广泛应用，这得益于生物样品液流技术、细胞分选计数技术以及计算机数据采集与信号分析

ELISA（酶联免疫吸附测定）实验常见标本的采集处理及保存方法对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。以下是对血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆液以及尿液、唾液等其他液体生物样本的采集处理及保存方法的详细介绍。 PART 01样本的收集与处理01血清 • 收集：使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集静脉血。 • 处理：将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。随后，在4℃条件下以1000×g离心20分钟，仔细收

一、淋巴结组织处理要点 1、淋巴结组织特性为结构紧密、细胞繁多，取样时需确保组织片厚度均匀，推荐0.2-0.3cm为最佳； 2、因淋巴结外包一层坚韧的结缔组织膜，阻碍液体渗透，故固定时间需延长至6-12小时，甚至可整夜固定，次日与常规组织同步脱水。若采用中性甲醛固定及乙醇脱水，两者时间均需加倍，同时可适当缩减二甲苯透明步骤的时间； 3、切片时，目标厚度为2-3μm，此厚度下组织易碎，展片时易出现皱褶、裂隙及不平整。因此，蜡块不

采血作为动物实验中常见的操作，对于药物研究以及疾病的诊断、治疗、监测至关重要。实验犬猫的动、静脉采血操作需要细致、准确，以确保采样的质量和动物的安全。本文将详细介绍实验犬猫动、静脉采血的操作步骤及注意事项，以期为实验提供参考。 动脉血液采集 动脉血液采样主要用于评估呼吸功能、严重凝血障碍等。采血时，应避免在细菌污染和感染风险高的部位采血，如局部组织损伤、皮肤感染区域。 操作步骤 1、保定姿势：将动物置于

2024年国家自然科学基金项目申请集中接收期间，国家自然科学基金委员会（以下简称自然科学基金委）共接收项目申请384564项，经初审和复审后共受理383126项。根据《国家自然科学基金条例》、国家自然科学基金相关项目管理办法和专家评审意见，经自然科学基金委委务会议审批，资助面上项目20758项、重点项目745项、重点国际（地区）合作研究项目87项、青年科学基金项目23226项、优秀青年科学基金项目654项、国家杰出青年科学基金项目433项、创新

品的固定、包埋和切片是生物医学研究、组织学分析和病理学诊断中非常重要的步骤，正确操作有助于保持组织结构的完整性、保存生物分子的空间位置以及获得高质量的实验结果。上期我们介绍了关于样品固定与包埋的相关内容[插入对应推文链接]，这期小编继续为大家介绍样品固定包埋之后的又一关键步骤——切片。切片结果的好坏将直接影响后续实验如原位杂交、免疫组化等检测效果。 目前最常用的两种组织切片方法是冰冻切片和石蜡切片，两

流式细胞技术（Flow Cytometry，简称FCM）是一种高效的方法，用于分析和收集细胞悬液中的单个细胞。FCM的优势在于其速度快、结果客观，并且具有重要的统计意义。它能够处理复杂的样本，同时收集多个参数，其可靠性和重复性都非常出色。 今天我将总结并分享一系列关于流式细胞技术的常见问题及其分析。对于流式细胞术的原理和步骤不甚清晰的同学，建议先阅读本公众号以往的文章，了解背景知识。 1.荧光抗体染色无信号或信号弱 （1）加入的抗